ELISA大致分为五种类型:直接法、间接法、竞争法、夹心法、捕获包被法。在ELISA试剂盒中用得比较多的是双抗体夹心法、竞争法和间接法。那么我先和你们讲一讲竞争法吧。
竞争法(Competitive ELISA)是用样本中的游离抗体/抗原与固相的酶标抗体/抗原竞争性结合的分析方法。当游离抗体(或抗原)浓度越高,则能与固定抗原(或抗体)结合的酶标抗体(或抗原)就越少,后续显色就越浅,即与对照相比,显色越浅,表示检测样本中抗体(或抗原)含量越高。该法特别适合小分子物质的检测也可用于检测比较不纯的样本,且重复性好,但是检测的灵敏度和专一性较差。竞争法测抗原常用于检测小分子抗原及半抗原,这类抗原通常缺乏两个以上的识别位点,不适用于双抗夹心法进行测定。该方法在商业化ELISA试剂盒中被广泛运用。
接下来我再说一下间接法,间接法(Indirect ELISA)只能用于测定抗体,主要用于疾病的诊断,其优点是只需要改变包被抗原,酶标抗体是通用的。间接法使用了二抗增加信号强度,也使抗体的选择多样化,然而间接法容易产生交叉反应。
以上就是ELISA竞争法和间接法的优势和用途,大家都看明白了吗。
|